Специфични стъпки за извличане на хлорофил чрез клетъчна фрагментация с помощта на ултразвукова клетъчна дробилка
Feb 20, 2024
Ултразвуковата клетъчна дробилка използва дисперсионния ефект на ултразвука в течност, за да създаде кавитация, като по този начин разбива твърди частици или клетъчни тъкани в течността.
Развитието на биологичната индустрия повиши изискванията за експерименти, използващи ултразвукови клетъчни пулверизатори, като измерване и контролиране на температурата на пробата, подобряване на нивото на интелигентност на нискотемпературните охлаждащи проби и цялата машина и т.н.
Специфичните стъпки за извличане на хлорофил чрез ултразвуково раздробяване на клетки с помощта на ултразвукова клетъчна трошачка:
1. Центрофугирайте или филтрирайте водната проба и поставете филтърна мембрана от ацетатни влакна върху смукателния филтър. Изсипете количествен обем водна проба за филтриране, като отрицателното налягане по време на филтриране не трябва да бъде твърде високо (около 50 kPa). След като вземете водната проба, продължете да изтегляте 1-2 минути, за да намалите влагата върху филтърната мембрана. Ако е необходимо краткосрочно съхранение за 1-2 дни, може да се съхранява в обикновен хладилник за замразяване. Ако е необходимо дългосрочно съхранение (30 дни), трябва да се съхранява в хладилник с ниска температура (-20 градуса).
2. Извадете филтърната мембрана, съдържаща фитопланктон, и я изсушете при ниска температура в хладилник за 6-8 часа. Нарежете го на малки парчета с ножица и го поставете в епруветка за центрофуга от 5 ml или 10 ml. Добавете 3-4 ml 90% ацетон, за да потопите фрагментите под нивото на течността. Поставете фрагментите в ултразвуков контейнер и използвайте ултразвукови вълни, за да разбиете клетките на пробата. (Сравняване на експерименти в различно време и честота, за да се улесни идентифицирането на * времето и честотата на фрагментация за унифицирани методи).
3. Центрофугирайте пробата, подложена на клетъчна фрагментация, като използвате ултразвук, като използвате центрофуга (3000-4000r/min) за 10 минути. Изсипете супернатантата в мерителна колба от 5 ml или 10 ml. Разредете до 5 ml или 10 ml с 90% ацетон и разклатете добре.
4. Поставете супернатантата върху спектрофотометър и използвайте 1 cm колориметрична паничка с оптичен път, за да прочетете стойностите на абсорбцията при дължини на вълните съответно 750 nm, 663 nm, 645 nm и 630 nm. Използвайте 90% ацетон като празно измерване на абсорбцията, за да коригирате абсорбцията на пробата.
